ال التهجين في الموقع هي طريقة للكشف عن الانحرافات الصبغية. يتم تمييز كروموسومات معينة بأصباغ فلورية وترتبط بمسبار DNA. تستخدم هذه التقنية للتشخيص قبل الولادة للطفرات الجينية.
ما هو التهجين في الموقع؟
في حالة التهجين في الموقع أو مضان في الموقع التهجين يتم الكشف عن الأحماض النووية من RNA أو DNA في أنسجة أو خلية معينة باستخدام الطرق الوراثية الجزيئية. عادة ما يستخدم هذا النوع من التشخيص للكشف عن شذوذ بنيوي أو عددي في الكروموسومات أثناء الحمل.
لهذا الغرض ، يتم استخدام مسبار مصطنع يتكون في حد ذاته من الحمض النووي. ثم يرتبط بالأحماض النووية في الكائن الحي من خلال الاقتران الأساسي. هذه الرابطة تعني مصطلح التهجين. يعتمد الدليل على البنية الحية للمريض وبالتالي يتوافق مع الأدلة الموجودة في الموقع. يجب تمييز ذلك عن طرق المختبر التي يتم فيها الكشف في أنبوب الاختبار. تم تطوير هذه الطريقة في القرن العشرين من قبل العلماء جو غال وماري لو باردو.
تطورت التكنولوجيا منذ ذلك الحين. بينما تم استخدام المجسات المشعة في ذلك الوقت ، على سبيل المثال ، تُستخدم اليوم المجسات ذات العلامات الفلورية ذات الرابطة التساهمية مع جزيئات العلامة.
الوظيفة والتأثير والأهداف
يستخدم التهجين في الموقع عادة للكشف عن الانحرافات الصبغية ، أي التشوهات الكروموسومية التي لا يمكن اكتشافها في مخطط karyogram. لذلك يتم استخدام الطريقة دائمًا عند تحديد الأمراض الوراثية أثناء الحمل.
نظرًا لأن الانحرافات الكروموسومية هي مشكلة لا ينبغي التقليل من شأنها اليوم ، فقد زاد استخدام الطريقة بمرور الوقت. يحدث التهجين على أساس الخلايا الأصلية من السائل الأمنيوسي للأم. أساس هذه التقنية هو ربط المسبار الملون بأجزاء الحمض النووي. بفضل الربط ، يمكن لاحقًا تقييم عدد النسخ بالمجهر ، نظرًا لأن النسخ الفردية تصدر إشارة ضوئية ويمكن بالتالي جعلها مرئية تحت المجهر. هناك إجراءات مختلفة. إما أن يتم التحليل مباشرة بعد الربط.
في هذه الحالة ، يتم استخدام صبغة فلورية مثل البيوتين ، والتي ترتبط مباشرة بمسبار الحمض النووي. باستخدام الطريقة غير المباشرة للتهجين في الموقع ، لا يمكن إجراء التقييم فورًا بعد التهجين ، حيث لا يمكن ربط المواد الفلورية بالمسبار إلا بعد التهجين. تُستخدم هذه الطريقة غير المباشرة أكثر من الطريقة المباشرة لأنه يُعتقد أنها أكثر حساسية. بالإضافة إلى مجسات الحمض النووي الخاصة بالكروموسوم ، هناك أيضًا تحقيقات الحمض النووي الخاصة بالموقع ، وتحقيقات مكتبة الحمض النووي الخاصة بالكروموسوم ، وتهجين الجينوم المقارن.
يمكن استخدام مجسات الحمض النووي الخاصة بالكروموسوم للكشف عن الانحرافات العددية الكروموسومية. هذا يعني أنها تستخدم بشكل أساسي عندما يكون هناك اشتباه في وجود كروموسومات مكررة أو محذوفة. تعد تحقيقات الحمض النووي الخاصة بالموقع مناسبة بشكل خاص للكشف عن الحد الأدنى من الطفرات التي لا يمكن اكتشافها في مخطط karyogram. يتم استخدام مسبار مكتبة الحمض النووي الخاص بالكروموسوم على وجه الخصوص للكشف عن عمليات الإدخال والانتقال.
تهجين الجينوم المقارن ، من ناحية أخرى ، هو تحليل شامل للخسائر والمكاسب في مادة الكروموسومات. اليوم ، يعد التهجين في الموقع مهمًا جدًا في تشخيص طفرات الكروموسومات المختلفة.في تشخيص متلازمة داون ، على سبيل المثال ، ترتبط المجسات بالكروموسوم 21. لهذا الغرض ، يتم استخدام مجسات خاصة بالكروموسوم ، والتي يمكن استخدامها في حالة الاشتباه في هذا المرض.
يمكن أن ينشأ شك ، على سبيل المثال ، إذا كان الوالدان قد أنجبوا طفلًا مصابًا بالمرض وكانت صورة الموجات فوق الصوتية غير طبيعية. إذا كان هناك رابطة ثلاثية بدلاً من رابطة مزدوجة وبالتالي خرجت إشارة ثلاثية الألوان ، فسيتم اعتبار التشخيص مؤكدًا.
المخاطر والآثار الجانبية والأخطار
على عكس ، على سبيل المثال ، PCR ، فإن التهجين في الموقع أقل عرضة للتلوث. بالإضافة إلى ذلك ، فإن الوقت المطلوب للعملية أقل بكثير. ومع ذلك ، نظرًا لأن الأجنة تشكل أنماطًا كروموسومية بشكل خاص ، فإن باقي التوزيع الكروموسومي وبالتالي لا يمكن استنتاج الحالة الوراثية للخلايا الأخرى من نمط معين.
يمكن أن تتداخل إشارات اللون أيضًا أو تظل غير مرئية لأسباب أخرى. نتيجة لذلك ، يكون التهجين في الموقع كأداة تشخيصية عرضة نسبياً للأخطاء أثناء الحمل. يمكن أن تنشأ التشخيصات الخاطئة وقد يقرر الوالدان عدم صحة الجنين. من أجل تقليل التعرض لأخطاء التهجين في الموقع ، يجب فحص خليتين جنينيتين على الأقل في وقت واحد. من خلال فحص خليتين على التوازي ، لا يوجد الآن سوى خطر ضئيل للتشخيص الخاطئ.
في مثل هذه الحالة ، يمكن للوالدين الاعتماد بشكل مطلق على التشخيص. لا يتم تقديم التهجين في الموقع لكل امرأة حامل ، ولكن فقط للنساء من مجموعة معرضة للخطر. ومع ذلك ، لا تُحرم النساء الحوامل من هذا النوع من التشخيص بناءً على طلبهن. يمكن أن تؤدي نتائج الموجات فوق الصوتية غير الطبيعية أو المصل غير الطبيعي إلى حث الطبيب على تقديم الإجراء التشخيصي. على الرغم من أنه يمكن تشخيص جزء كبير من الانحرافات الصبغية ، ولكن ليس كلها بأي حال من الأحوال ، باستخدام التهجين في الموقع.
لذلك ، يجب ألا يتم إجراء التهجين في الموقع بمفرده ، ولكن يجب استخدامه دائمًا مع اختبار الكروموسوم التقليدي. تلعب رعاية المرأة الحامل دورًا رئيسيًا في هذا الإجراء. قبل التحليل ، تجري الأم المستقبلية مناقشة متعمقة حول طريقة التشخيص ، والتي تشرح المخاطر والإمكانيات وحدود التكنولوجيا.
